超低温冰箱:动物组织保存方法对比
目前常用的动物组织保存方法有低温冷冻法,甲醛浸泡法、石蜡包埋法和乙醇浸泡法等,不同保存方法有各自的特点及优缺点。动物组织的长久保存是进行DNA测序、分子遗传学研究和法医鉴定等的重要前提,动物组织保存的质量直接影响后期DNA提取的产量和质量。
低温冷冻法利用低温(-20℃低温冰箱、-80℃超低温冰箱或-196℃液氮中)抑制DNA酶的活性从而长期保存组织DNA,该方法保存效果较好,但是其保存条件严格,保存成本高且容易受到停电等偶然事件的影响。
甲醛浸泡法通过甲醛使DNA酶失活从而保存DNA,该方法对于动物组织有着较好的固定作用。但甲醛会使蛋白质与DNA发生严重的交联,使DNA很难从组织中完全释放出来,另外,甲醛还会引起基因组DNA的片段化和修饰,导致后期DNA提取过程中难以获得大量完整的片段。此外,甲醛具有很强的毒性,该方法对操作人员具有潜在的危害。
石蜡包埋法也是动物样品保存的传统方法,然而其浸蜡、包埋及储存过程都会对动物组织中的DNA造成不可恢复的损伤。该方法也需要使用甲醛,因此也会造成后期DNA提取的困难。
乙醇浸泡法利用乙醇的渗透作用将动物组织脱水、DNA酶失活进而保存组织DNA。虽然乙丛组织渗透作用迅速且无毒无害,但有研究表明,长时间保存在乙醇中的动物组织会松软弥散,导致保存的组织块变少,乙醇也会对基因组DNA产生切割作用,形成长度较小的DNA片段,且乙醇极易挥发,长期保存后乙醇浓度会降低,无法达到良好的保存效果。